发布时间：2023-10-07 15:42:27
绪论：一篇引人入胜的近视眼预防方法，需要建立在充分的资料搜集和文献研究之上。搜杂志网为您汇编了三篇范文，供您参考和学习。
一、问题的提出
随着教育现代化工程的有力推进，尤其是基本均衡、优质均衡发展示范区等的建设，学校硬件设施逐步改善，基本达到现代化水平。学校的竞争力更多的应该体现在教师的竞争，体现在教师的教育观念、知识素养、教育教学能力等有关教师专业能力的竞争。长期以来，各校都比较重视校本研修、校本教研，但方式还不够灵活，尤其是大多采用自上而下的方式，缺乏创新的举措，效果并不理想。
作为地处武进西部的农村小学，我校教师的专业发展则更受到了地域、经济的制约，外出学习的机会较少，引进优秀人才也不大现实，教师的专业发展与城区优质学校具有一定的差距，必须充分利用机遇，探索行之有效的方式，在新一轮的发展中迎头赶上。
前几轮三年主动发展规划中，学校充分利用自身优质资源，通过成立教师专业发展协进会，教师专业行动计划，青蓝工程，校级名师工作室等，营造了积极的校园氛围，促进了教师队伍的整体提高。然而，我们也发现，因为区域规划调整等历史问题造成了师资超编的现象，使得学校近十年来，直到去年才有新教师的引入，学科教师年龄大多集中在四十岁左右，利用自身优势，闭门造车使得教师发展呈现原地踏步的现状，如何改变与跟进？如何面向全体教师的专业发展？如何用杠杆撬动教师专业成长？新一轮规划中提出“要建设一支爱岗敬业，业务精良的优秀教师团队。‘五级梯队’人数达30人，实施名师领雁共同发展工程，创新校本研修模式，引领全校教师专业发展。”这一目标如何实现？
如何克服教师培训从上至下，如何调动全体教师参与教研的积极性，如何调动教师主动发展的追求？3月，华师大教授、中学校长培训中心主任吴志宏教授应邀来校进行了两天的教育教学调研指导，30日下午与全体数学老师进行了一次教研工作坊培训，整整一个下午，老师们从分组教案设计，推荐代表交流，观摩名师录像，比较不同研讨，专家点评讲座，在任务的驱动下，大家积极探讨、互相启发、大胆表达，研讨氛围相当热烈。老师们说这是一次头脑风暴，的确，第一次的尝试就给了大家深切的感受。这种新的教研方式给我们带来很多启发与思考。以工作坊为教研形式，将研讨贯穿整个活动，让每个教师带着思考来，带着思考走，每个人都成为教研活动的主体，这样一种教研方式不是能促进每个老师的发展吗？我们确立本项目，就是要探寻教研工作坊的实施基本形式与策略，以及考量对教师发展的促进作用。
二、概念的解读与创新
工作坊是一种可以提供各种不同立场、族群的人们思考、探讨、相互交流的方式，也是目前越来越流行的一种提升自我的学习方式。
教研工作坊，顾名思义，教研活动以工作坊的形式展开，与传统的教研方式相比较，工作坊应当具备一些鲜明的特征：1、探讨的话题往往更有针对性。很多相关领域的前沿话题，课题研究的内容，学科教学中的一个问题等都可以成为工作坊的主题。2、组织形式更为灵活。可以在某人的家里，也可以在正规的会议室里面，更可以在旅游景点，工作坊的时间与地点都比较灵活。主持人可以是专家、领导，也可以是普通教师，可以是一个人，也可以是几个有共同话题的老师。3、参与性强。一般的民众参与方式，大致上来说都是先由台上的主持人以及报告人先行报告，此时台下的民众只能做单方面的聆听，或在会后发问讨论。工作坊可以让每一个参与者互相发表意见，以游戏的方式带动参与者的参与感，用轻松的方式让参与者了解其规划的动机、目的，以及规划地点的现况，不仅可以获得多方的意见与想法，更有利于议题的讨论及整体活动推行。
我们研究并采用的工作坊，设想有如下形式，1、专家面对面式教研工作坊。有针对性的邀请某一方面的专家、领导与教师开展对话；2、名师比较式教研工作坊。网络提供的大量名师讲座、录像成为了工作坊比较教研的充足资源；3、教师参与式教研工作坊。
我们努力让研讨贯穿每次教研活动的始终。在每个活动之前增加了讨论环节，在活动之前每人形成观点，打破以往无准备的教研活动方式；活动过程强调教师的全程参与，将参与贯穿活动始终。活动结束，引申总结或是引发新的问题。工作坊的主题来源多样，教师可以自主参加感兴趣的工作坊。工作坊将培训发展的需求真正交予教师。
三、实践研究的过程
确定了教研工作坊来改进我们的教研活动方式之后，我们精心设计了项目研究方案，项目组根据既定的方案和计划，开展了理论研究和实践探索，将工作坊与学校的各项教研活动相结合，尝试不同的组织形式，逐步形成了学校自己的一套做法。大致经历了以下几个阶段：
第一阶段：尝试研究，形成项目
吴志宏教授的教育教学调研指导，那场别开生面的工作坊研讨活动，全体参与教师，尤其是许多中老年教师全程参与，并且全身心投入，思考、研讨、评议、讨论，既结合了平时自身的教育经验，又能针对现实教育中遇到的问题，成为了教研活动的主体，给了我们很多的触动，原来，教研方式的转变的确可以让中老年教师成为教研活动的主体，并且实现自身的价值。
为保障项目的有序有效实施，学校成立了项目研究领导小组。校长任项目领导小组组长，全面主持项目实施工作。副校长任副组长，全面负责项目的组织、管理和协调。另外，由教导处、教科室具体负责项目的实施与管理。同时，确立了以骨干中层、教研组长、骨干教师为主体的研究主要成员。并且特邀华东师范大学教授、博士生导师吴志宏、原武进区教育局副主任科员郑国源担任本项目的顾问，负责项目实施操作指导。
项目方案初稿形成后，我们举行了两次项目设计论证会议，邀请了学校课题领导小组全体成员对项目的现实意义、可行性以及方案的可操作性进行了论证；邀请教育局副主任科员郑国源对方案进行论证与修改，保证了项目设计尽可能完善。
同时，项目申报前后，我们就从书籍、报刊、网络等途径收集、整理有关工作坊方面的文献资料，编印了《教育文摘》等资料专辑，使得项目组教师了解和把握当前有关研究的发展态势，使我们在更高的基点上开展研究，在学习和借鉴优秀经验的基础上形成我校的研究思路。此外，我们积极组织教师自主收集相关的理论学习材料，开展自主学习，并组织教师撰写教学心得，开展专题研讨交流，使得项目研究工作更具针对性，有效性。
第二阶段：实证研究，全面推开
首先，制订语文、数学、英语、艺体“教研工作坊”活动计划。
在学习相关理论以及充分研讨的基础上，确定了我校教研工作坊的具体实施形式。学校所有教研活动采用教研工作坊的形式，将研讨贯穿活动的全过程，促进教师的参与和思考，从而提高活动的效率。1、专家面对面式教研工作坊；2、名师比较式教研工作坊； 3、教师参与式教研工作坊。并且形成了基本的操作流程：首先分组对教学内容进行研讨，初步形成小组意见，并且进行大组汇总；然后，观摩教师的课堂教学，进行比较探讨；最后，指名教师进行围绕教学内容，主题教学讲座或是观看名师录像、专家讲座。并且分学科根据学科教学中的实际问题或是课程改革的需要，制定了各学科教研工作坊的实施计划。
其次，围绕设计目标，依据具体实施策略，开展研究。我们要求各教研组围绕实施计划，每学期至少开展两次以上的工作坊。期初两周内要确定好工作坊的主题以及承担人员，确定好工作坊的实施形式，纳入学校教学工作计划、教科研工作计划。每次活动前两周，公布研讨活动的教学内容，各备课组进行集体商议，确定教学设计，并且确定中心发言人。工作坊活动时，各备课组首先交流各组的教材理解与教学设计，而后集体观看名师录像或是观看某一备课组的教学展示，最后进行比较研讨。各备课组严格按照计划认真组织，积极开展相关活动，提高了全体教师参与教研的积极性，年老教师既成为教学设计的策划者，也成为比较教学与研讨的主力军；年轻教师既要承担代表发言，还要承担公开教学，更能主动询问年老教师的设计意图，提升了对教材的理解能力，教学设计创新而又不忽略基础。
第三、在项目实施中发现问题，分析问题，及时调整策略，稳步推进。
对于教研工作坊的实施，我们遵循原有的计划与学习经验总结，然而，我们总感觉教研工作坊的组织形式，尤其是它的实施过程显得过于单一。结合课例的研讨虽然针对性强但总觉得面对有些教学中遇到的问题却无法实施。
4月27日一大早，卜弋小学又迎来了学校最尊贵的客人：吴志宏教授，这是吴教授第二次来到卜弋小学，对学校教育教学进行调研指导。
上午，吴教授首先走进学校的语文课堂。下午，吴教授又对学校的项目设计《工作坊——教师发展快车道》研究工作进行了指导。全体校级领导、教研组长、备课组长以及项目组团队成员参加了研讨活动。首先，项目组介绍了“工作坊”项目实施的进程以及在研究过程中遇到了困惑。吴教授肯定我们的研究与成效，同时结合我们提出的问题，对于工作坊的实施指出了三个注意点：一要选择好一个恰当的主题；二是主持人必须要做好充分的准备工作；三要调动所有教师的参与意识。尤其是我们的实施形式，只是工作坊实施的形式之一，过于单一。接着，吴教授详细阐述了工作坊的系统理论，又结合了操作实例，让项目组老师对于工作坊的形式与实施要点有了更加清晰的认识，对于运用工作坊这种新的校本培训方式促进教师专业发展，解决教学实际问题有了更大的信心。
在此基础上，我们将教研工作坊的形式进行了拓展和演变，通过调查问卷确定相关问题提炼主题，活动中参与者阐述自己或是备课组的具体做法，观看相关视频或是倾听学校自己老师的研究成果，相关专家点评以及明确具体工作等形式应运而生。同时，将教研工作坊与课题研究的主题、教研室研究专题等结合，“情境化高效课堂的建构策略”“课内语言实践活动的组织与开展”“三、四年级英语教材的比较”等工作坊很好的解决了课程改革等的实际问题。
研究过程中，全体项目组定期对项目实施进行了回顾与总结，比较实施前后教师发展的心态与活动状态，总结近年教师的发展成果。梳理项目实施的具体形式与策略，三种形式基本达成共识，以工作坊形式开展教研活动成为学校的常规。
第三阶段：第三阶段：总结提升，不断创新
经过几年的探索，我们基本形成了工作坊基本形式与实施途径：
1、专家面对面式教研工作坊
与一般专家的讲座、培训，或是听课指导不同的是，我们将首先根据学校发展、教师发展需求，邀请有关专家，其次活动过程，先分小组围绕主题进行探讨交流，形成小组观点，接着进行小组交流，然后由专家进行点评与讲座，再由教师提问，谈区别、收获和感受，谈今后工作的设想。
2、名师比较式教研工作坊
网络技术的发展，包括配套的多媒体、视频等更多地应用于教育教研，使得无缘与名师面对面的教师眼界进一步开阔。但往往我们的方式主要是观摩名师录像，接着进行点评。而名师比较工作坊我们可以采用这样两种方式。其一，确定教学内容，将参与教师分组进行教学设计，形成观点；接着进行大组交流；然后观摩名师录像，谈不同与感受，最后由指定教师进行总结性发言，尤其要总结某类课型或是名师风格，确定某一类课型的教学要求。其二，确定教学内容，进行集体备课，进行教学观摩，然后观摩名师课堂，最后进行比较，总结不同与不足，进行教学改进。
3、教师参与式教研工作坊
与以往教研活动的方式不同的是，教师参与式工作坊更强调教师的参与，尤其是将研讨活动提前到观课之前。以往教研活动，往往是一个或几个人的备课，活动时首先观摩课堂教学，而后进行评课讲座。而参与式工作坊，首先仍然要分组对教学内容进行研讨，初步形成小组意见，并且进行大组汇总；然后，观摩教师的课堂教学，进行比较探讨；最后，指名教师进行围绕教学内容，主题教学讲座。另外，也可以是根据学校主题安排，教师个人或是几个人集体申报，然后整个教研工作坊由教师组织与安排。活动过程可以先抛出问题或是课例，倾听参与教师的意见，而后主持人将研究成果进行展示，可以是相关的教学处理，可以是相关理论的介绍，也可以是自己的成功做法。最后再比较研讨的基础上，主持人提出自己的相关主张。
其次，教研工作坊的思想逐渐深入人心，它的形式我们觉得可以在基本形式的基础上灵活变动。基本的思路是，每个活动之前增加了讨论环节，在活动之前每人形成观点，打破以往无准备的教研活动方式，将参与贯穿活动始终，从而真正提高研究实效，促进教师专业快速发展。另外，工作坊的主题可以由学校根据发展需求制定规划，老师们自主申报，也可以是教师自己提出。工作坊可以是学科的，也可以是主题的。可以是长线的一至三年，也可以是短线的一到两次。教师自主参加感兴趣的工作坊。将培训发展的需求真正交予教师。具有推广的价值。
四、效果与反思
1、形成教师主动发展机制。
对于像我们这样年龄结构偏大的学校来说，教研工作坊更好的促进了教师的发展。教师发展不再是船到桥头车到站的感觉，形成一种你追我赶的发展态势，尤其是中老年教师参与教研的积极性得到激发，在教研活动中扮演了重要的角色，教师参与研究的热情高涨，自觉性增强了。近年来，优秀教师比例不断扩大，我们的五级梯队教师，中小学高级教师比例在周边学校都名列前茅。
中图分类号：C710 文献标志码：A 文章编号：1009-4156(2011)04-040-02
一、目前开放式实验室功能的局限性
现在通常把高校开放式实验室看做是传统的实验教学模式的改革，因为实验教学在培养学生科学素养和创新能力方面具有明显的优势，相对于理论教学具有直观性、实践性、综合性和创新性的特点。通过实验室的开放，可以有效培养学生的实践能力和创新能力。实验室的开放也主要是指针对本校学生进行的实验仪器设备与时间概念上的开放，仅仅是对不同实验科目、实验题目、研究课题开放。这种开放虽然充分利用实验室的地域条件、设备条件、学术条件和教师的技术优势，将实验室的所有有效资源全部提供给学生进行实验教学、实践教学和科学研究，初步实现了一定条件下的资源共享，但这种开放并不充分。实验室的开放对象是学生，学生成为实验的主体。进行的实验内容也是学校设定的内容，无论是设计性实验还是综合性实验，也只是帮助学生完成应有的教学内容，为教学服务。高校的开放式实验室并没有走向社会，与真实的社会实践脱轨，对于理工科学生来说，无论教师如何指导学生，学生也不可能有获得一线工作的任何体验，也不可能有机会尝试研究一线工作的任何技术课题，这对学生是一个损失。同时，与高校密切联系的企业在具体生产实践过程中，无论人才培养还是技术攻关，实际上都无法得到高校的有效支持，这脱离了高校服务地方的方针。实验室目前的开放过于保守，存在功能上的局限，不是彻底全面的开放。
二、实验室对外开放的困难
对于大多数高校来说，除教学时间外，大多数时间实验室和设备都处于闲置状态，这无疑是资源上的浪费。本质上高校是愿意把自己的资源转换成社会生产力的，但高校存在自己的困难。
1. 实验室管理体制存在问题。开放式实验室由于过去长期只为教学服务，在制度上过度依附学校。实验室的管理人员和实验指导人员适应了对学生的管理和教学，管理体制已经僵化，管理过于呆板，没有创新和服务意识。面向企业人员的管理，既缺乏经验又无配套的制度保障。同时，企业人员技术层次参差不齐、实验能力不足、对设备的了解程度不够、人员素质难以保证，也为管理增添了困难。
2. 实验室指导教师不足。实验室的对外开放对指导人员的各种能力是一种考验。因为实验内容与实践接触得更加紧密，实验过程中随时会出现各种各样的问题，使实验变得复杂，难度加大，涉及的知识面也在不断加宽，科研在实验中的比例也大大增加，这就要求实验指导人员应该具有较高的业务能力和一线工作经验，这是一个挑战。此外，学校的实验室除保证教学外，还增加了科研的比重，实验室的工作变得更加繁重，实验室人员不足的矛盾会凸显出来，因此，需要加大实验室人力资源的投入。
3. 实验室经费不足。大多数高校实验室建设都是以教学为目的的，没有考虑实验室的社会化服务，因此，在设备更新、设备维修、耗材配备、实验室人员劳务支出等方面资金投入都不大，而高校实验室社会化服务需要大量资金作保证，这是个不争的事实。这笔资金从哪里来?要求学校加大投入是不现实的，高校属于事业单位，并没有过多的收入。资金来源主要依靠上级主管部门，而上级主管部门配置的资金是有限的，无法支撑实验室的对外开放。
三、实验室对外开放模式的建立
1. 加强实验室的制度建设。制度建设是实验室对外开放的关键，没有好的制度进行管理，就会给实验室的正常教学工作带来麻烦。实验室必须在保证教学的情况下才能对外开放。因此，建议实验室在对外开放的过程中采用预约登记的方式。在开学之初对学生的实验教学首先进行安排，再将可开放的时间对外公布，使企业人员能够根据自己的实际需要和生产时间选择实验室和实验时间。如从事电机生产的人员可以提前预约电子电工实验室研究电机故障的排除方式，并把实验人员的基本信息报实验室备案，进行严格审核。这不但便于实验室管理人员提前准备，还为实验室的安全提供了保证。
必须建立针对校外人员的设备管理制度、安全管理制度、仪器设备损坏赔偿办法等管理制度，同时，对进入实验室的人员还要签订书面合同，约定双方的权利和义务，加强实验室的管理，以保证实验室的正常运行。
实验室也需要建立对实验室工作人员的管理制度，并对实验室人员定期进行培训，提高管理人员的素质，使实验室管理人员能够严格执行实验室的规定，从制度方面保障实验室开放的可持续发展。
2. 实验室开放资金的投入。实验室的有效运作需要资金的维持。除了争取学校对实验室加大投资，实验室还要学习自给自足，以弥补资金上的不足。完善实验室自身的造血机能，使其良性运转，可以采用以实验室开放养实验室运营的方式。实验室对校外人员进行开放时适当收取耗材费用和仪器使用费用，这种方式在许多大学都在使用，只是尚未形成制度和规模。开放实验室及实验室的仪器设备，收取的仪器使用费、场地费和人员培训费可以用于实验仪器的养护和维修，同时也为实验室仪器的更新提供了资金保障。当然，必须完善财务管理，对费用的支出根据实际情况建立完善的制度，以保证所有资金能够合理地用于实验室的再建设。
3. 实验室工作人员的梯队建设。实验室的工作人员应当是一个梯队，梯队由教授、副教授、高级实验师、高级工程师和普通实验员组成。他们各有分工，教授、副教授主要负责校企联合项目的研发，根据企业的实际情况制订科研和教研计划，将研究成果转化成经济效益，签订横向项目，同时也可以为企业的自主科研计划做可行性论证和为企业制订适当的培训计划；高级实验师、高级工程师除参与项目的研发之外，还负责复杂故障的排除、制订仪器的购置计划、对大型精密仪器进行管理；普通实验员则负责日常工作的管理，包括制订工作计划、调配实验室教学和科研的关系、设备的简单维修、实验耗材的购进等。实验室的梯队要不断加强建设，加大对人员的培训，全面提高人员的业务素质，使实验室的工作人员既能够完成教学计划又能够了解企业的需求，具备科研公关能力。
此外，高校的实验室建设不应把学生排除在外，开放实验室的建设包括对学生的培养。解决实验室管理人员不足的问题，可以考虑将学生纳入实验室管理的队伍，使学生有机会参与实验室的各项工作，包括实验室的管理和科研工作。这不仅仅是实验室梯队建设的有效补充，学生们分担了实验室工作人员的压力，同时，学生在实验室还得到了充分的锻炼，并
且有机会直接接触用人单位，跟随教师在企业一线工作，提前进入见习阶段。比起单纯枯燥的理论讲解，实践无疑是一个提高学生各方面综合能力、创新能力的好办法，也是培养学生职业素养的一个好途径，为大学生的就业创造了良好的条件。
4. 开放实验室的文化建设。开放实验室要有自己的文化氛围，它是实验室的灵魂，良好的文化建设将促进实验开放的良性发展。这种文化氛围应该是实验室工作人员在长期的合作过程中培育出来的共同遵守的最高目标、价值体系、职业道德、团队意识、基本信念和行为规范。实验室开放使处于象牙塔中的教师和学生有机会接触到更复杂的社会环境和经济氛围，不进行自身的品德的培养和文化建设，会受到社会不良风气侵扰，影响高校学术的发展。要把实验室建成一个学术风气纯正、团结进取、孜孜以求的科研基地。文化建设是实验室开放不可缺少的重要组成部分，也是实验室对外开放持续发展的必要保障。
四、实验室开放对校企间的相互促进作用
实验室对外开放对保障校企之间相互促进、协调发展有重要意义。
1. 实现了大学的对外的社会功能，使大学真正能为社会、企业和地方经济服务。校企的紧密结合可以促进高校科研的发展，因为这使教师有机会接触到工厂中最前沿的技术问题，教师有了自己的研究方向，也有了创造价值的基地。同时，学校的科研成果也可以及时转换为生产力，这一点非常重要。我国高校科研成果转换为生产力的效率并不高，转换的周期也相当长，创造的经济效益也有限，这使许多学者十分痛心，有些人为了给自己的研发成果寻找投资历尽辛苦，从某种程度上讲也抑制了高校科研的积极性，因此，科研成果的快速转化是对科研工作的极大鼓励，对经济建设也有重要的意义。
2. 企业从中获得的利益十分丰厚，它可以从高校的科研机构获得更先进的技术和生产工艺，这为企业节省了时间和研发经费，使企业有更多的精力和时间进行生产。高校的对企业的服务不仅包括科学技术的支持，还包括人才的培养和培训，使企业业务人员的水平上一个新的台阶，促进企业的发展。
3. 为培养学生职业素养提供了一个新平台。大学生就业难已经是一个不争的事实，就业难固然有其经济发展的客观原因，但大学生高分低能、综合职业技能不高也是大学生就业难的重要因素。几个月的短暂实习远不能满足学生的实训要求，开放的实验室为学生提供了实训基地，使学生有更多的机会接触一线用人单位，了解他们的需求，并根据需要调整自己的职业规划，发展自己的能力，实现了学生与企业的无缝接轨，保证学生学到的知识在企业中能发挥作用，使学生一就业就成为工厂的技术骨干，这是高校人才培养的最高目标。
学校实验室的开放在企业、教师和学生之间架设了一座使他们紧密联系起来的桥梁，实现了学校和企业之间的双赢，为高校和企业切实解决了许多实际的问题。
中图分类号 G642.0 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）23-17-02
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等多具有吞噬功能，均由骨髓干细胞分化而来，是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。当病原微生物或其他异物侵入机体时，由于巨噬细胞具有趋化性，便向异物处聚集，巨噬细胞可将之内吞入胞质，形成吞噬泡，然后在胞内与溶酶体融合，将异物消化分解，这在机体非特异性免疫中具有重要意义。静息的巨噬细胞吞噬功能低下，只有活化状态下的巨噬细胞才具有较强的吞噬能力。现在所用细胞实验教材[1-4]所编列吞噬实验大多用鸡红细胞、羊红细胞、墨水、杆菌[5]、荧光微球等作为吞噬物，本文首次使用鱼血细胞作为吞噬物，对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬效果进行了探索和研究，以期避免使用家禽作为实验材料，并进一步完善了实验方法。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 鱼血红细胞稀释液的制备 从市场上购买鲫鱼，用注射器尾静脉采血，或解剖后从鱼血窦或心脏抽取鱼血。抽取的鱼血，不添加抗凝剂，直接用无血清L15培养基（Gibco，invitrogen Corporation），稀释10倍。配成10%鱼血红细胞悬液备用。
1.1.2 3%可溶性淀粉溶液的制备 称取可溶性淀粉3g，溶于100mL生理盐水中，混匀后121℃高压灭菌20min备用。
1.2 方法
1.2.1 小鼠腹腔巨噬细胞的诱导 在实验前3d，连续3d定时给小鼠腹腔注射3%淀粉液。注射部位在腹部中央，持针以45°斜角刺入，注意勿伤及内脏或注入肠内，注射后揉动腹部，分散淀粉粒，并观察注射后动物状态，以免小鼠死亡。
1.2.2 鱼红细胞的注射及腹腔液的收集 实验时，小鼠腹腔注射10%鱼红细胞悬液1mL，轻按小鼠腹部，使悬液分散。60min后，用颈椎脱臼法处死小鼠。将小鼠腹面朝上，于腹部中央用有齿尖镊夹起皮肤层，用剪刀剪一环口，撕开腹部皮肤，充分暴露腹膜。此时，向腹腔注射1mL生理盐水，并轻揉腹部片刻。随后用剪刀剪开腹膜成一纵形口，用镊子将两边皮肤夹起来，以防腹腔液流出。把内脏推向一侧后，可用不装针头的注射器或吸管吸取腹腔液，小心操作，以免腹腔内血管破裂，吸取到小鼠腹腔外周血细胞。
1.2.3 制片及染色方法 取腹腔液滴于洁净的载玻片上，按血涂片制备法制备细胞涂片。空气干燥后，载片放入100%甲醇液的固定缸中固定5min。固定后的载片，采用扣染法，即用牙签架起载片，细胞面朝下反扣在玻板上，用Giemsa染色液（Giemsa原液1份，0.075mol/L磷酸缓冲液9份）染色载片，染色时间为20min。染色完成后，揭起载片，用滴管吸取蒸馏水轻缓冲洗载片，洗去多余的染液。
1.2.4 显微观察及吞噬百分率和吞噬指数的计算 载片空气干燥后，在OLympus BX41显微镜下观察，用DP70摄像头进行显微拍摄，并用IPP5.0软件进行显微照片标尺标记。40倍物镜下已能观察到游离的鱼红细胞及吞噬鱼红细胞的巨噬细胞。实验共用小鼠5只，实验过程中未出现死亡，每只小鼠制备5片涂片。每片随机观察数个视野，记录100个吞噬细胞的吞噬结果，计算吞噬百分率、吞噬指数。吞噬百分率（%）=吞噬鱼红细胞的巨噬细胞数/计数的总巨噬细胞数（吞噬及未吞噬的）×100。吞噬指数=巨噬细胞中所吞噬的鱼红细胞数/计数的总巨噬细胞数。
2 实验结果
2.1 巨噬细胞吞噬状态 在普通光学显微镜下，可清晰观察到主要的三类细胞，鱼红细胞、未吞噬鱼红细胞的巨噬细胞（图1中1）及吞噬一个或数个鱼红细胞的巨噬细胞（图1中2～4）。鲫鱼红细胞多为长椭圆形，核常位于细胞中部，胞核染为深紫色。巨噬细胞大多呈不规则形状，胞体表面不光滑，常有突触，细胞核较大，呈肾形、圆形或其他不规则形状，染为紫红色。巨噬细胞吞噬鱼红细胞，常能观察到以下几种吞噬状态：巨噬细胞内鱼红细胞膜仍完整；巨噬细胞内鱼红细胞膜不完整或破裂；巨噬细胞内具有一个或数个大小不等的鱼红细胞细胞核；还可观察到巨噬细胞膜凹陷，鱼红细胞紧贴在凹陷处正在被吞噬。图1显示激活状态的巨噬细胞及多种吞噬鱼红细胞的状态。
2.2 吞噬率和吞噬指数 实验测得小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鱼红细胞的吞噬率为25.0%，吞噬指数为0.31。与鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数相近[6-7]。
3 讨论
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验是生物科学及医学专业本科层次细胞生物学课程开设的实验必修项目。近年来，由于禽流感[8]的流行，细胞生物学教学实验室通过多次试验、反复摸索和研究“小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验”这一实验内容，在传统方法的基础上不断改进。主要的改进有以下3个方面：一是采用小鼠实验前连续3d定时免疫，有效增加了腹腔内处于激活状态的巨噬细胞数量。二是取鱼血红细胞作为吞噬物，且所取鱼血不用添加抗凝剂，直接用不加血清的L15细胞培养液来稀释血细胞，实验效果明显，完全符合实验要求。三是染色方法的好坏直接关系到对实验结果的观察，本实验应用Giemsa染色扣染法，巨噬细胞及鱼红细胞染色均清晰，细胞的形态结构更加明显，能有效地分辨各类细胞的细胞核、细胞浆及吞噬鱼红细胞的各种状态。此实验方法已用于我院本科生实验教学，师生们普遍认为实验结果便于学生观察和计数，有助于学生对吞噬细胞吞噬作用的理解和掌握，提高教学效果。
综上所述，采用鱼血细胞作为吞噬物，实验结果明显，吞噬率及吞噬指数均高于或接近于鸡红细胞的数据，并进一步完善了实验方法，实验结果更直观与清晰。同时巨噬细胞吞噬实验常用于免疫增强药物活性的测定，其中以体内法最能反应实际吞噬能力，这一方法常用鸡红细胞来进行测定，是否也可用便于取材的鱼红细胞来测定，值得进一步实验和探讨。
参考文献
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